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Seccionamiento: Una mirada más profunda

Existen numerosos factores que deben tenerse en cuenta al preparar tejido para la tinción IHC. Debido a la diversidad de tejidos y medios que pueden ser involucrados, existe una variabilidad significativa en la preparación de muestras y no hay una respuesta única para las mejores prácticas. Sin embargo, algunos factores clave que contribuyen pueden ser identificado. Un factor que a menudo se pasa por alto es el espesor del corte.

La cantidad de luz que se permite pasar a través del tejido es fundamental para el examen microscópico. Esto está parcialmente controlado por el espesor de la sección, lo que afecta el contraste,la nitidez y los detalles morfológicos del tejido bajo el microscopio, influyendo así en gran medida en la calidad de la tinción.

Generalmente, las secciones más gruesas demuestran una mayor intensidad de tinción debido a que hay más proteínas presentes y etiquetadas en un formato tridimensional más grueso.

Por ejemplo, una sección de 7 zwm tendrá una mayor intensidad de tinción en comparación con una sección de 4 µm. Además, lo que es visible en una lente de 7 µm­ es posible que falte una sección gruesa en una sección de 4 µm de espesor, ya que hay menos tejido presente.

Otra área a considerar en el espesor del corte es cómo afecta el contenido y la composición del bloque. Las células pueden variar en tamaño de 1 a 100 µm. En los mamíferos, los orgánulos y componentes celulares varían de manera similar en tamaño. Un ribosoma puede tener 0,2 µm de diámetro, mientras que el núcleo de una célula puede tener tiene un diámetro de 6 µm.

Como resultado, las secciones de diferentes tamaños representarán visualmente mejor los diferentes componentes celulares, como la membrana,el citoplasma o el núcleo. Las secciones de tejido >5µm pueden producir más variación en la intensidad de la tinción y facilitar la evaluación de la tinción citoplasmática y de la membrana. más complejo que el de la tinción nuclear.

A la hora de determinar el grosor de la sección también deben tenerse en cuenta la conservación del tejido y el medio de inclusión. El tejido se hace más firme mediante el proceso de fijación para preservar su estructura y después puede infiltrarse con un medio como cera o plásticos, para sostenerlo, o puede congelarse en fresco. El grosor de las secciones suele oscilar entre 8 y 15 µm para las s e c c i o n e s congeladas, entre 4 y 10 µm para las secciones de cera y entre 0,5 y 3 µm para las secciones histológicas de plástico. Para la tinción IHC, las secciones se cortan entre 3-5 µm.

El espesor del corte a menudo se pasa por alto como un factor en la tinción IHC resultados, pero siempre se debe considerar en términos de tejido. Conservación, medio de inclusión y calidad de la tinción.

A un Como mínimo, la coherencia en el corte es fundamental para la calidad del atención al paciente para evitar la variabilidad y los resultados confusos.

Seccionamiento El grosor tiene implicaciones importantes en la atención médica, tanto ahora como en el futuro a medida que la patología de la imagen digital se vuelva más prominente.

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